4)反应生成的有色化合物成分恒定，化学性质稳定 。
3.1.2显色条件的选择吸收分光光度法测定显色反应达到平衡后溶液的吸光度 。因此，为了得到准确的结果，有必要研究平衡，了解影响显色反应的因素，并控制适当的条件，使显色反应完全而稳定 。
1)根据溶液平衡原理，显色络合物的稳定常数越大，显色剂越过量，越有利于待测组分形成显色络合物 。但过量显色剂的加入有时会导致副反应，不利于测定 。
2)酸度对显色反应有多种影响 。通过实验确定了金属离子与某种显色剂反应的适宜酸度范围 。测定方法是固定待测组分和显色剂的浓度，改变溶液的pH值，测定其吸光度，做出吸光度-pH值曲线，选择曲线平坦部分对应的pH值作为测定条件 。
3)显色反应一般在室温下进行，有些反应需要加热，以加快显色反应，使其完全 。
4)大部分显色反应需要一定时间才能完成，其长短与温度有关 。还会被空气体氧化或发生光化学反应使眼睛颜色变弱 。因此，有必要通过实验做出一定温度下吸光度-时间关系曲线，以获得合适的显色时间 。
干扰的消除
1)干扰的类型在光度分析中，共存离子如自身颜色或与显色剂相互作用生成有色化合物，都会对测定产生干扰 。
A.干扰离子本身有颜色 。
B.干扰离子本身没有颜色，但能与显色剂反应形成稳定的络合物 。如果生成的络合物有颜色，会直接干扰测定；如果生成的络合物无色，也会降低显色剂的浓度，影响被测离子与显色剂的反应，产生误差 。
C.干扰离子与被测离子反应生成络合物或沉淀，影响被测离子的测定 。
2)消除干扰的方法a .控制溶液的酸度 。b、加入掩蔽剂，与干扰离子形成更稳定的化合物，使干扰离子不再产生干扰 。c .用参比溶液消除一些有色干扰离子的影响 。选择合适的工作波长以消除干扰 。e .采用适当的分离方法 。
3.2吸光度测量条件的选择
3.2.1应根据吸收光谱曲线选择入射光的波长，选择溶液有最大吸收时的波长作为入射光的波长 。例如，显色剂和钴络合物在420nm波长处具有最大吸收峰 。如果在该波长下测定钴，未反应的显色剂会造成干扰并降低测定的准确度 。因此，必须选择500纳米的波长，在该波长下显影剂不吸收 。钴络合物有一个吸收平台 。
3.2.2对照溶液的选择1)如果只有供试品与显色剂的反应产物有吸收，可使用纯溶剂作为对照溶液 。2)若显色剂或其他试剂有轻微吸收，则使用空白色溶液(无样品溶液)作为对照溶液 。
3)如果样品中的其他成分被吸收，但不与显色剂反应，则当显色剂未被吸收时，样品溶液可作为对照溶液 。当显色剂被轻微吸收后，在加入显色剂前，可在供试品溶液中加入适当的掩蔽剂掩蔽待测组分，此溶液可作为对照溶液 。
3.2.3选择吸光度读数范围的实践证明，当吸光度在0.2-0.5范围内时，测量的相对误差最小 。调节被测溶液吸光度的方法有两种:1)控制被测溶液的浓度 。例如改变取样量、改变溶液的浓度或稀释度 。2)选择不同的比色皿 。吸光度小的溶液应使用光程长的比色皿，吸光度大的溶液应使用光程短的比色皿 。四 。应用
4.1应用领域
4.1.1高含量组分的测定-差示法当待测组分含量较高时，测得的吸光度值往往偏离朗伯-比尔定律 。即使没有偏差，通常也是用纯溶剂作为参比溶液(常见的光度法)，这样测得的吸光度过高，超过了合适的读数范围，导致误差较大 。这个缺点可以用微分法来克服 。但应用差示法时，要求仪器光源有足够的发射强度或能增加光电流放大倍数，这样才能将参比溶液的透过率调整到100% 。这就要求单色仪质量高，光电系统稳定性好 。
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