第二层和第三层机制其实是差不多的，我们以豹狮为例 。豹子和狮子在非洲有分布重合，二者同样是不会在自然条件下发生交配行为的，但是，在人工干预下（将一头小狮子和一头小豹子，雌雄各异，从小养在一起，到了发情期，它们就可能会交配）就会发生杂交行为 。但是，由于二者的染色体差异很大，在结合时大都是互相排斥的，所以豹狮兽的产出率不足1‰，这也是世界上一共产生了两头豹狮的原因 。
而且即使二者的染色体勉强结合了，产生了豹狮，豹狮的染色体也无法进行正常的减数分裂，很难产生后代，这就是杂交后有后代，而后代几乎不具备繁殖能力的生殖隔离机制 。哈士奇与狼为什么不存在生殖隔离？上面我们说过，生殖隔离是在两种不同动物之间才会产生的，而且两种动物的生物学分类差距越大，生殖隔离越明显 。简单的说就是同科同属不同种的动物杂交产生后代的几率要远高于同科不同属的两种动物 。
而哈士奇和狼其实是一种动物，从生物学分类上看，哈士奇是家犬的一种，而家犬是灰狼的亚种之一，也就是说狼与哈士奇是同种不同亚种的两种动物，它们的杂交被称为“种内杂交” 。那么，为什么哈士奇在灰狼的亚种之下呢？因为现存的所有的家犬都是有野生的灰狼驯化而来的，这一点早在2016年科学家就通过对世界各地狗的DNA与狼对比就证实了，而且根据科学家的研究发现，现代犬起源于亚洲，驯化时间大约在距今1.4-1.5万年前 。
看到这里，有些小伙伴会有疑问：现在的狗形态各异，与狼的差异如此的明显是怎么回事？当然，现代犬已经不是单纯狼驯化而来这么简单的，确切地说现代犬是由多个灰狼的亚种驯化后又经过了杂交才有的，在杂交的过程中，经过人的筛选和定向培育，在不同的环境下，狗才有了与狼迥然不同的形态 。哈士奇作为家犬之一与其他的家犬一样都是由狼驯化之后，再与野生的狼和其他驯化后的狼杂交才出现的一种犬 。
【哈士奇跟什么交配的,这很哈士奇……】所以，从本质上说，哈士奇与狼是一种动物，它们的差异也仅限于种内差异，所以二者不存在生殖隔离 。总结哈士奇和狼是一种动物，只不过一个是驯化后又经过杂交后的动物，所以二者的基因相似度高达99％以上，而在这万年的与人相处中，差异化就体现在了那不足1％上，这些差异让二者的食性、习性以及外观有了一定的差异 。而且二者属于同种不同亚种，它们之间自然就不存在生殖隔离 。
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